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MEM培養基操作步驟
  • 發布日期:2021-08-03      瀏覽次數:623
    •    MEM培養基是一種基本、適用范圍廣的培養基,是動物細胞培養中常用的培養基之一。MEM培養基僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,成分簡單,主要用于貼壁細胞的培養,配方修改后也可用于其他類型細胞培養。MEM含NEAA(非必須氨基酸)的培養基,是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。
        MEM培養基操作步驟:
        1.配置前準備:配置培養基新制備的milli water。調節pH值的酸堿溶液也應該使用這種水配置。制備培養基的器皿清洗干凈,并用milli water潤洗兩次。
        2.溶解培養基:取5%終體積的milli water,加入到1L玻璃杯中,將干粉培養基倒入燒杯,水洗包裝袋內面兩次,倒入培養液中。磁力攪拌助溶。
        3.補加試劑:根據包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。
        4.加抗生素:一般抗生素終濃度——青霉素100U/ml,鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲備液。
        5.調pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH調節pH到7.2。
        6.過濾除菌:采用0.22um濾膜。過濾后分裝于小瓶中(100或200ml)。過濾后pH值一般上升0.1-0.3。
        7.加小牛血清:根據培養基配置的量將小牛血清分裝,冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。
        MEM培養基的一些基本知識點先介紹到這里了,如果您還想要了解更多內容,歡迎來咨詢我們。
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